Сравнительное изучение различных питательных сред для изоляции возбудителей из крови больных висцеральным лейшманиозом
Аннотация
Обоснование. Лейшманиоз – трансмиссивное заболевание, вызываемое простейшими рода Leishmania, которые являются облигатными внутриклеточными паразитами и поражают макрофаги. Заболевание эндемично для многих тропических и субтропических стран, а также для стран Средиземноморского бассейна.
Висцеральный и кожный лейшманиоз также считаются эндемичными для Азербайджана. Вакцину против лейшманиоза до сих пор не удалось разработать. Для разработки вакцин и новых лекарственных препаратов против этого заболевания, а также для изучения биологии паразита важно получить культуру возбудителя in vitro. Для этого в первую очередь необходимо выделить паразитов из крови пациента.
Цель. Целью исследования было определение оптимальных питательных сред для изоляции из крови и последующего культивирования паразитов Leishmania.
Материалы и методы. В данном исследовании использовалась периферическая кровь 3 пациентов с висцеральным лейшманиозом, направленных из Геранбойского и Шамкирского районов Азербайджанской Республики. Образцы крови промывали, помещали в стерильные культуральные флаконы 25 см2 с питательными средами, инкубировали при температуре 27°C и исследовали под инвертированным микроскопом. В процессе культивирования использовались различные питательные среды: 15% RPMI-1640, 20% DMEM-high glucose, NNN.
Результаты. На 8-9-е дни культивирования в питательной среде NNN наблюдалось 250 000 паразитов/мл, в средах RPMI-1640 и DMEM-high glucose – 450 000 и 600 000 паразитов/мл. В последующие дни развитие паразитов в среде NNN ослабевало (100 000 паразитов/мл), тогда как на других питательных средах, наоборот, усиливалось (1 100 000; 1 300 000 паразитов/мл). Питательная среда NNN может быть рекомендована для изоляции паразитов Leishmania из крови пациентов, а RPMI-1640 и DMEM-high glucose – как для изоляции, так и для длительного культивирования паразитов in vitro.
Скачивания
Литература
Аллахвердиев, А. М., & Багирова, М. И. (2023). Эпидемиология, диагностика, лечение и профилактика лейшманиоза. Зардаби. 128 стр.
Джафаров, И. А. (2025). Биостатистика. Табиб. 250 стр. ISBN 978-9952-39-330-9.
Алиева, Ш. Н., Гусейнова, Ф. И., & Абсейнова, З. З. (2025). Сравнительное изучение развития in vitro паразитов Leishmania в различных питательных средах. Scientific Research International Scientific Journal, 5(2), 113–117. https://doi.org/10.36719/2789-6919/42/113-117
Castelli, G., Galante, A., Lo Verde, V. et al. (2014). Evaluation of two modified culture media for Leishmania infantum cultivation versus different culture media. J Parasitol, 100(2), 228–230. https://doi.org/10.1645/13-253.1
Chavush, I., Aksoy, T., Yıldırım, A. et al. (2022). Could RPMI-1640 Medium be Used in the Diagnosis and Isolation of Cutaneous Leishmaniasis Lacking NNN Medium? Turkish Journ of Parasitol, 46(3), 249–252. https://turkiyeparazitolderg.org/articles/doi/tpd.galenos.2022.27247
Chouihi, E., Amri, F., Bouslimi, N. et al. (2009). Cultures on NNN medium for the diagnosis of leishmaniasis. Pathol Biol, 57(3), 219–224. https://doi.org/10.1016/j.patbio.2008.03.007. EDN: https://elibrary.ru/MCPRBR
Echchakery, M., Chicharro, C., Boussaa, S. et al. (2020). Molecular identification of Leishmania tropica and L. infantum isolated from cutaneous human leishmaniasis samples in central Morocco. J Vector Borne Dis, 57(1), 71–77. https://doi.org/10.4103/0972-9062.308804. EDN: https://elibrary.ru/INPHVT
Fang-Zhou, C., Yue-Tao, Y., Chun-Hua, G., & Jun-Yun, W. (2019). Observation on growth and reproduction of various Leishmania isolates in different culture media. Zhongguo Xue Xi Chong Bing Fang Zhi Za Zhi, 31(3), 294–298. https://doi.org/10.16250/j.32.1374.2018180
Gadzhibekova, E., Aliyeva, N., & Huseynova, F. (2018). The epidemiology of leishmaniasis in the Barda region of Azerbaijan. Scientific works of the Research Medical Preventive Institute, 11, 103–107.
Gokmen, A. A., Oncel, K., & Ozdemir, O.A. (2015). An alternative biphasic nutrient medium for the diagnosis of cutaneous leishmaniasis. Mikrobiol Bul, 49(2), 266–271. https://doi.org/10.5578/mb.8913
Kwang, P.C. (2023). Leishmania and Leishmaniasis Research: The Past 50 Years and the Future. Pathogens, 12(6), 776. https://doi.org/10.3390/pathogens12060776. EDN: https://elibrary.ru/ZIAUKX
Ladopoulos, T., Ntais, P., Tsirigotakis, N. et al. (2015). The proliferation potential of promastigotes of the main Leishmania species of the old world in NNN culture medium prepared using blood of four different mammals. Exp Parasitol, 157, 124–127. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2015.07.008
Limoncu, M.E., Ozbilgin, A., Balcioglu, I.C., & Ozbel, Y. (2004). Evaluation of three new culture media for the cultivation and isolation of Leishmania parasites. J Basic Microbiol, 44(3), 197–202. https://doi.org/10.1002/jobm.200310367
Mohammadpour, I., Motazedian, M.H., Handjani, F., & Hatam, G.R. (2016). Cutaneous Leishmaniasis of the Eyelids: A Case Series with Molecular Identification and Literature Review. Korean J Parasitol, 54(6), 787–792. https://doi.org/10.3347/kjp.2016.54.6.787
Ozbilgin, A., Chulha, G., Uzun, S. et al. (2016). Leishmaniasis in Turkey: first clinical isolation of Leishmania major from 18 autochthonous cases of cutaneous leishmaniasis in four geographical regions. Trop Med Int Health, 21(6), 783–791. https://doi.org/10.1111/tmi.12698. EDN: https://elibrary.ru/WTTLFN
Salekhov, A.E., & Mamedov, M.G. (2022). The role of parasitic diseases in the pathology of Azerbaijan and their prediction for the near future. Modern achievements of Azerbaijani medicine, (3), 62–66.
Salekhov, A.E., Shikhaliyeva, Sh.T., Huseynova, F.I., & Gadzhibeyova, E.A. (2022). Dynamics of visceral leishmaniasis in the population of the Republic of Azerbaijan. Nature and Science, (6), 6–10.
Santos, R.C.D., Pinho, F.A., Passos, G.P. et al. (2018). Isolation of naturally infecting Leishmania infantum from canine samples in Novy-MacNeal-Nicolle medium prepared with defibrinated blood from different animal species. Vet Parasitol, (257), 10–14. https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2018.05.010
WHO. (2018). Manual on case management and surveillance of the leishmaniases in the WHO European Region. 1–13.
World Health Organization (WHO). (2020). Leishmaniasis. https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/leishmaniasis
References
Allahverdiev, A. M., & Bagirova, M. I. (2023). Epidemiology, diagnosis, treatment and prevention of leishmaniasis. Baku: Zardabi. 128 p.
Jafarov, I. A. (2025). Biostatistics. Baku: Tabib. 250 p. ISBN 978-9952-39-330-9.
Alieva, Sh. N., Guseynova, F. I., & Abseynova, Z. Z. (2025). Comparative study of in vitro development of Leishmania parasites in various culture media. Scientific Research International Scientific Journal, 5(2), 113–117. https://doi.org/10.36719/2789-6919/42/113-117
Castelli, G., Galante, A., Lo Verde, V. et al. (2014). Evaluation of two modified culture media for Leishmania infantum cultivation versus different culture media. J Parasitol, 100(2), 228–230. https://doi.org/10.1645/13-253.1
Chavush, I., Aksoy, T., Yıldırım, A. et al. (2022). Could RPMI-1640 Medium be Used in the Diagnosis and Isolation of Cutaneous Leishmaniasis Lacking NNN Medium? Turkish Journ of Parasitol, 46(3), 249–252. https://turkiyeparazitolderg.org/articles/doi/tpd.galenos.2022.27247
Chouihi, E., Amri, F., Bouslimi, N. et al. (2009). Cultures on NNN medium for the diagnosis of leishmaniasis. Pathol Biol, 57(3), 219–224. https://doi.org/10.1016/j.patbio.2008.03.007. EDN: https://elibrary.ru/MCPRBR
Echchakery, M., Chicharro, C., Boussaa, S. et al. (2020). Molecular identification of Leishmania tropica and L. infantum isolated from cutaneous human leishmaniasis samples in central Morocco. J Vector Borne Dis, 57(1), 71–77. https://doi.org/10.4103/0972-9062.308804. EDN: https://elibrary.ru/INPHVT
Fang-Zhou, C., Yue-Tao, Y., Chun-Hua, G., & Jun-Yun, W. (2019). Observation on growth and reproduction of various Leishmania isolates in different culture media. Zhongguo Xue Xi Chong Bing Fang Zhi Za Zhi, 31(3), 294–298. https://doi.org/10.16250/j.32.1374.2018180
Gadzhibekova, E., Aliyeva, N., & Huseynova, F. (2018). The epidemiology of leishmaniasis in the Barda region of Azerbaijan. Scientific works of the Research Medical Preventive Institute, 11, 103–107.
Gokmen, A. A., Oncel, K., & Ozdemir, O. A. (2015). An alternative biphasic nutrient medium for the diagnosis of cutaneous leishmaniasis. Mikrobiol Bul, 49(2), 266–271. https://doi.org/10.5578/mb.8913
Kwang, P. C. (2023). Leishmania and Leishmaniasis Research: The Past 50 Years and the Future. Pathogens, 12(6), 776. https://doi.org/10.3390/pathogens12060776. EDN: https://elibrary.ru/ZIAUKX
Ladopoulos, T., Ntais, P., Tsirigotakis, N. et al. (2015). The proliferation potential of promastigotes of the main Leishmania species of the old world in NNN culture medium prepared using blood of four different mammals. Exp Parasitol, 157, 124–127. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2015.07.008
Limoncu, M. E., Ozbilgin, A., Balcioglu, I. C., & Ozbel, Y. (2004). Evaluation of three new culture media for the cultivation and isolation of Leishmania parasites. J Basic Microbiol, 44(3), 197–202. https://doi.org/10.1002/jobm.200310367
Mohammadpour, I., Motazedian, M. H., Handjani, F., & Hatam, G. R. (2016). Cutaneous Leishmaniasis of the Eyelids: A Case Series with Molecular Identification and Literature Review. Korean J Parasitol, 54(6), 787–792. https://doi.org/10.3347/kjp.2016.54.6.787
Ozbilgin, A., Chulha, G., Uzun, S. et al. (2016). Leishmaniasis in Turkey: first clinical isolation of Leishmania major from 18 autochthonous cases of cutaneous leishmaniasis in four geographical regions. Trop Med Int Health, 21(6), 783–791. https://doi.org/10.1111/tmi.12698. EDN: https://elibrary.ru/WTTLFN
Salekhov, A. E., & Mamedov, M. G. (2022). The role of parasitic diseases in the pathology of Azerbaijan and their prediction for the near future. Modern achievements of Azerbaijani medicine, (3), 62–66.
Salekhov, A. E., Shikhaliyeva, Sh. T., Huseynova, F. I., & Gadzhibeyova, E. A. (2022). Dynamics of visceral leishmaniasis in the population of the Republic of Azerbaijan. Nature and Science, (6), 6–10.
Santos, R. C. D., Pinho, F. A., Passos, G. P. et al. (2018). Isolation of naturally infecting Leishmania infantum from canine samples in Novy-MacNeal-Nicolle medium prepared with defibrinated blood from different animal species. Vet Parasitol, (257), 10–14. https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2018.05.010
WHO. (2018). Manual on case management and surveillance of the leishmaniases in the WHO European Region. 1–13.
World Health Organization (WHO). (2020). Leishmaniasis. https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/leishmaniasis
Copyright (c) 2026 Akif E. Salekhov, Shahla N. Aliyeva, Fatma H. Huseynova, Zivar Z. Abseynova, Sevinj N. Eyvazli, Shahla N. Janahmadova, Elgun A. Ismayilova, Shalala M. Babayeva
Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution-NonCommercial-NoDerivatives» («Атрибуция — Некоммерческое использование — Без производных произведений») 4.0 Всемирная.
